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[圖(tu)文]原核(he)細(xi)(xi)胞(bao)表達(da)系統主(zhu)要(yao)使用(yong)大(da)腸(chang)桿菌,真(zhen)核(he)細(xi)(xi)胞(bao)表達(da)系統主(zhu)要(yao)有酵母細(xi)(xi)胞(bao)、哺乳(ru)動物細(xi)(xi)胞(bao)10.超聲波破菌或高壓破菌,然(ran)后用(yong)50mL離心管于8000r/min,4℃,離心40min,取。

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重(zhong)組幽門螺桿菌粘附(fu)素(su)的純化工(gong)藝(yi)目的純化大腸(chang)桿菌表達的重(zhong)組幽門螺桿菌粘附(fu)素(su)。方法將表達HpaA蛋(dan)白的工(gong)程菌經(jing)高壓(ya)均(jun)質機破菌獲(huo)得包(bao)涵(han)體,經(jing)洗(xi)滌(di)、變性(xing)、復性(xing),Q。

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主權項(xiang)一(yi)種重組幽(you)門螺桿菌熱休克蛋(dan)白A基因(yin)工程疫苗制備(bei)中的純化(hua)方(fang)法,其(qi)特征在于:用發(fa)酵(jiao)方(fang)式高密度表達rHspA后,采用高壓破菌、過濾,鎳離子親(qin)和層析(xi)、濃縮裂解。

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采用對基因工程菌(jun)(jun)進行高(gao)壓破菌(jun)(jun)、過濾(lv),鎳離子親和(he)層析純(chun)化、濃縮裂解(jie)、凝膠過濾(lv)層析及復(fu)性等技術,獲(huo)得高(gao)純(chun)度的重組(zu)幽門(men)螺桿(gan)菌(jun)(jun)熱休(xiu)克蛋白A。該(gai)發明純(chun)化工藝簡捷、容易。

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(2)高壓(ya)勻漿機大(da)規模(mo)生(sheng)產用,對菌體量無限制。破菌效果好,但要(yao)注意冷(leng)卻。(15)純(chun)化系(xi)統的純(chun)化系(xi)統了(le)。推薦品牌:AKTAexplorer、AKTAPurifier.不。

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[0019]a、將(jiang)細菌菌體(ti)均(jun)勻的懸浮于BufferA中,高(gao)壓勻槳(jiang)破(po)菌,將(jiang)破(po)菌液離心[0095]AKTA蛋白(bai)多肽純化系統(tong)Purifier100購(gou)自PharmaciaBiotech[0095]AKTA。

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